降钙素原的克隆、表达及多抗制备
降钙素原的克隆、表达及多抗制备
目的 合成降钙素原的全长基因,表达出降钙素原的融合蛋白并制备多抗,为降钙素原(PCT)的功能研究及单抗制备提供有力的实验基础。 方法 采用多引物人工一步合成基因技术合成降钙素原的全长基因,克隆至原核表达载体 pGEX-4T-1表达出重组蛋白,将初步纯化的蛋白免疫小鼠制备多抗并进行 Westernblot鉴定。
结果 成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,Westernblot证实所制备的 PCT多抗可与所获得的融合蛋白和病人血清发生特异性反应。
结论 成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,为明确降钙素原来源和病理生理作用的研究奠定了基础,以及为制备其单克隆抗体提供实。
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