印第安纳型水泡性口炎病毒核衣壳蛋白基因在毕赤酵母表达系统中的表达
摘要:将含有IN型VSV核衣壳蛋白基因的重组质粒pET一32a/N用EcoRI和NotI进行双酶切,目的基因克隆到表达载体pPICZαA,构建重组质粒pPICZαA/N。用SacI酶切线性化,并以电转化方法转化受体酵母茵GS115。PCR证实目的基因整合到重组酵母茵染色体中,经鉴定所获得的重组酵母菌株为Muts表型。用甲醇对重组酵母进行诱导表达.经SDS-PAGE和Westernblot鉴定,核衣壳蛋白基因在毕赤酵母中获得表达,目的蛋白分子量大小为约75kDa.表达量约占茵体总量的20%,并能够被VSV阳性血清所识剐,可用于VSV的血清学检测。
关键词:水泡性口炎病毒:核衣壳蛋白基因;毕赤酵母表达系统