抗哇巴因鸡蛋黄抗体 IgY的制备
张明娟 ,杨 军,强 磊,段 宗明,朱参战 ,王聪霞
目的:制备出高特异性的抗哇巴因多克隆抗体 ,为进一步提高内源性哇巴因的检测的敏感性和特异性提供实验基础。
方法:采用不同剂量哇巴因一牛血清白蛋白耦联物(O.5 mg/kg;1.0 mg/kg)免疫母鸡,收集鸡蛋;采用聚乙二醇法分离 、纯化鸡蛋黄中抗哇巴因抗体;用酶联免疫吸附法检测 IgY(yolk immunoglobulin)的抗体效价。SDS-PAG电泳分析 IgY纯度。
结果:免疫后1周,鸡蛋黄中可检测出IgY 免疫后6周,鸡蛋黄中IgY 的效价迅速升高 ,最高效价达到1:10 240,持续至少4周 。结果还显示 ,大剂量免疫母鸡获得高效价抗体持续时间较长 砖论采用大剂量哇巴因一牛血清白蛋白耦联物免疫母鸡 ,可以获得较高效价的抗哇巴因IgY。该方法简单,高效价抗体持续时间长 ,是制备抗体较为有效的方法 。