毕赤酵母表达乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化和免疫效果

【摘要】
    目的    研究重组毕赤酵母表达的乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化方法及免疫效果。
    方法    甲醇诱导含preS2S基因的重组毕赤酵母茵，采用蔗糖区带速率离心、Butyl-S-Sepharose4FF疏水层析和DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析等方法，对表达产物进行纯化。纯化后蛋白经SDS-PAGE和Western-blot方法鉴定，制备成疫苗，并进行效力试验。放射免疫法检测免疫小鼠血清抗体浓度，计算ED和相对效力。ELISA法检测血清中的preS2S抗体。
    结果    纯化后的preS2(epi)s蛋白相对分子质量约为27000，且能与特异性抗体结合。两批纯化蛋白制备的疫苗ED分别为0.35和0.48t~,／ml，参比苗为0.52g／ml。2批疫苗的体外相对效力分别为1.5和1.1，均合格，血清抗体平均浓度为808和784IIlIU／rrIl，参比苗为312mlU／ml。2批疫苗免疫小鼠后均产生了preS2抗体。结论该纯化方法实用有效，纯化后的preS2(epi)S蛋白比S蛋白具有更好的免疫原性。

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