我也提提问，我构建毕赤酵母表达时，连接自己的目的基因时，是直接在我的目的基因“ATG.......TAA”前面，和后面加上酶切位点，还是需要在“ATG”前边加一段序列呢？
有的文献中提到：表达的效率，与“ATG”前面的非翻译区长短有关。真的吗？怎莫确定非翻译区的序列和长短为最好？
请高手指点

我查了一下，直接加上就行，我就这样试试

对于胞内表达的载体，在ATG前面加一段kozak序列，才能有效表达外源基因。
对于分泌表达载体，将外源基因加入到载体信号肽序列的正确读码框后即可。详见invitriogen的毕赤酵母试剂盒的手册17页。