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小 发表于 07-12-19 09:26 只看该作者
EB病毒膜蛋白在CHO细胞中的表达
EB病毒膜蛋白在CHO细胞中的表达
【摘要】
目的 研制EB(Epstein-Barr)病毒基因工程疫苗。
方法 构建了含有Epstein-Barr病毒(EBV)膜蛋白(MA)基因的重组表达质粒pCMV/ MA,转染CHO细胞,研究表达产物的生物学性状,及培养液中不同血清含量、冻存、G418对CHO细胞分泌MA的影响。
结果 获得两个稳定表达MA的细胞株。免疫印迹检测表达产物的分子量约为340kD和 220kD,间接免疫荧光和免疫斑点确定表达产物能与抗MA的单克隆抗体特异性结合,用薄层扫描和Lowry法计算MA的表达量为每天119μg/ml。经纯化的MA免疫小鼠,在血清中检测到抗MA的特异性抗体。
结论 为开发有效的表达系统用于EB病毒基因工程疫苗的生产提供有利的实验基础。
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