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蛋白浓缩方法



蛋白浓缩方法

蛋白浓缩方法基本有:

丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……

1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。

2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!

3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析),选择硫酸按是因为:盐析有效性,pH范围广,溶解度高,溶液散热少,经济!

4,(低温)有机溶剂沉淀法:强调低温(0-4度以下)是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2+离子,pH值

5,聚乙二醇沉淀法:使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性!他溶解是散热低,形成沉淀的平衡时间短,通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀!

6,超滤法:主要针对小体积蛋白质溶液(几ml)此法更不易引起变性!不过得有浓缩器,不是哪个实验室都有的!

7,透析法:主要用于更换蛋白质的缓冲液!的有透析袋!不需要特殊的仪器!

8,离子交换层析:可用阴离子交换树脂进行浓缩!

9,冷冻干燥法:在冷冻状态下让扬品种的液体升华

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Re: 蛋白浓缩方法

‘聚乙二醇沉淀法:使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性!他溶解是散热低,形成沉淀的平衡时间短,通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀!’

请教楼主这里讲的30%是指什么概念?PEG浓度?

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Re: 蛋白浓缩方法

是,不过聚乙二醇的分子量是多少就不是很清楚。

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Re: 蛋白浓缩方法

[quote user="一世情缘"]是,不过聚乙二醇的分子量是多少就不是很清楚。[/quote]


我们用过PEG20000

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Re: 蛋白浓缩方法

一般来说,蛋白浓缩用的PEG分子量较大,这样它的浓缩效率比较高。PEG20000最为常用。

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Re: 蛋白浓缩方法

抱歉来晚了,各位都替我回答了。

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Re: 蛋白浓缩方法

还有一种方法比较简单的方法,就是把蛋白溶液装入透析袋中,然后放到4度,用风扇吹,这样也可以浓缩,蛋白还不会变性。

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Re: 蛋白浓缩方法

蛋白浓缩用大分子量PEG(如20000)的另外一个原因就是,大分子量的PEG不会透过透析袋,以免造成蛋白污染。

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Re: 蛋白浓缩方法

这里的高手很多。

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武林三国

Re: 蛋白浓缩方法

有的实验室用纯度较好的蔗糖浓缩,效果也很好,只是作为小分子物质,可能会通过透析袋污染蛋白,此方法可不可用就要看蛋白最后用作什么了;

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