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小 发表于 07-12-5 10:17 只看该作者
重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体的构建及其应用
重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体的构建及其应用
【摘要】
目的 构建表达人内皮细胞抑制素(Endostatin)的重组腺病毒载体，并进行活性检测。
方法 将含有IL3分泌肽的人Endostatin全长cDNA插入穿梭质粒pAdCMV产生重组质粒pAd-IL3-Endo，通过脂质体介导与pBHG10共转染293细胞，经同源重组产生重组腺病毒Ad-IL3-Endo。体外转染人结肠癌SW620细胞并观察其上清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的影响。
结果 扩增到的Ad-IL3-Endo的滴度为4.3×1012空斑形成单位(pfu)/L，多聚酶链反应(PCR)显示在转染的细胞中有人Endostatin cDNA的存在，Westernblot显示转染细胞上清中有人Endostatin蛋白表达，台盼蓝染色显示其上清作用72h后HUVEC的生长被抑制了67%(P<0.05)。
结论 所制备的重组人Endostatin腺病毒载体能有效表达具有生物学活性的人Endostatin，为进一步的研究奠定了基础。
【关键词】 腺病毒; 基因表达; 血管形成抑制剂附件: 您所在的用户组无法下载或查看附件
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实迷途其未远，觉今是而昨非
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