一种简易、廉价、高效构建重组腺病毒载体的方法

摘要
    目的：建立构建重组腺病毒载体的简易、廉价、高效方法，为进一步应用含自杀基因的重组腺病毒治疗恶性肿瘤奠定基础。
    方法：PmeI线性化腺病毒穿梭质粒批pAdTrack-CMV、切胶纯化，与腺病毒骨架质粒 pAdEasy-1按一定比例混合后，以化学转化法导入大肠杆菌BJ 5183，在菌内进行同源重组， 构建重组腺病毒质粒rpAdEasyGFP，以脂质体法将重组质粒转染293细胞包装重组腺病毒rpAdEasy。
    结果：细菌内同源重组率高达80%； 在293细胞中成功产生重组腺病毒。
    结论：对目前应用广泛的AdEasy系统进行了有效改进，在获得较高阳性重组率的同时，降低了对实验室设备的要求。

这是文献中的方法吧。
我的实践证明，如果采用AdEasier-1细胞的话，挑最小的菌落，重组率为100%，有实验数据为证。