一篇关于巴斯德毕赤酵母的总述型文献
文献名称:《巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展》
文献简介:这篇文献系统地介绍了巴斯德毕赤酵母的产生发展历程,并结合实验本身的
特点,进一步介绍了载体类型、载体元件(包括启动子、选择标记和信号肽序列)、受体类型、以及提高整合拷贝数等方面的进展,对研究人员宏观掌握酵母表达有较大的帮助。
文献亮点:提高整合拷贝数的主要方法
a.不同的转化方法导致产生天然高拷贝转化子.巴斯德毕赤酵母的转化方法有原生质法、电激法、氯化锂法等,其中以原生质法转化使细胞群中产生的多拷贝转化子频率相对较高,但若使用G418检测拷贝数,则配合电激法转化的效果较好 .
b.体外在载体上多次插入目的基因片段,如前述的pAO815系列.但这种多拷贝整合不太稳定,且拷贝数有限。
c.将载体中目的基因两端连上来自宿主rDNA或其他非必需高重复的基因片段,通过同源重组而达到高拷贝整合的目的.由于rDNA在酵母基因组中有100~200个重复单元,所以这是一种提高拷贝数的理想方式.
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