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[原核表达] 蛋白表达两条带



蛋白表达两条带

大家有没有遇到蛋白表达出现两条带的情况,两条带都是表达出来的,不是载体和宿主本身的,不知道是怎么回事

[ 本帖最后由 怡儿 于 07-11-25 15:22 编辑 ]
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原核表达

另外还有,电泳图上1,2各位两个连接产物转化后的菌落,不知道为什么蛋白大小也不一致,请大家帮忙,谢谢

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两条带,其中有一条可能是降解产物,还可能是电泳时变性不彻底造成的.

"上1,2各位两个连接产物转化后的菌落"   这要看测序结果,根据读码框来分析.
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谢谢,已经拿去测序了,等结果出来再讨论
另外一方面,我在用其他载体表达的时候全部形成包涵体,包涵体也会有这种情况,全菌蛋白电泳因为表达量较高,看不出来两条带,但是包涵体两条带就很明显(不是说包涵体不容易被降解吗)。把全菌和包涵体一起跑电泳,发现从位置上看,包涵体两条带中下面那条带是和全菌中目的蛋白的位置是一致的,那就说明不是降解的问题

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切胶做质谱,鉴定一下两条带都是什么

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武林三国
你的mark怎么看起来也是有两条带的啊?有没有重新电泳看一下啊?会不会是电泳的问题呢?建议重新做次表达!

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