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pET-28a(+)的阳性转化子如何筛选



pET-28a(+)的阳性转化子如何筛选

RT 小弟新手刚开始做分子,不知道pET-28a(+)的阳性转化子如何筛选,用卡那平板可以吗?:time:
尘世间迷途小书僮.

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我觉得因该可以。Pet28a的抗性不就是Kan吗?我用的卡那板铺,然后挑的单菌。
本帖最近评分记录
  • 纤夫 威望 +1 精彩解答 07-11-21 08:32

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呵呵,前一阵有人要pET-28a(+)的质粒,给了他。结果告诉我转化不出来,怀疑俺们的质粒有问题。一问,用的是Amp的板子,大汗~~~
生命诚可贵,实验价更高。

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有没有该质粒DNA序列?

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有的阿,这个论坛就有啊,很全面的不过再给你发一个吧。希望能够帮助你
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武林三国

我正用PET28A+,可以交流下

我正用PET28A+做原核表达,今后可以交流下
亲爱的甘荻丽娜
我终将远行
风帆扬起,迷雾散尽

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我现在也用Pet-28a(+)做表达,已经把基因连进去了,酶切也没问题,不过SDS-PAGE电泳死活没预期条带,正在努力中

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武林三国
我也在用pet-28b,刚开始酶切!

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我正准备用PET28A+做原核表达,还没开始~~

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武林三国

新手求助

请问谁知道PET28A+做原核表达时培养的最是条件是啥啊?我提28A的质粒好多天了,总是没结果,老板给了个六年前的甘油菌,用含10mg/L kan抗性的液体LB培养基进行37℃ 培养,培养了18个小时收集到的菌体还是很少一点 根本提不出质粒来

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