连接产物转化后，挑斑抽质粒，加Sollution2轻轻颠倒几次，冰置后仍是混浊的，再加Sollution3沉淀是颗粒装，最后什么也没提出来！我之前做过一次也出现这种情况，怀疑是杂菌，后来又重新酶切，连接，转化，但还是这种情况，不知道是什么原因，Sollution1，2，3别人用都是好好的，所以可以排除溶液的原因，平板，感受态也没有污染，我做过对照，没长斑。请各位帮忙指导下，谢谢！

以前碰到过，有些时候莫名其妙的问题和结果。
一般和质粒抽提关系不大，恐怕还是在转化和感受态上找问题。
做阴性对照同时再做个阳性对照看看吧。

你换个感受态细胞试试，我以前遇到过，是感受态细胞变异出现假的阳性菌所以你挑的可能不不是你想要的！

没有长斑的对照是阳性对照还是阴性对照?

我认为所谓阴性对照是看你的感受态有没有污染，如果没污染当然是不长斑的；阳性对照我们一般用的是空载，主要看感受态的转化效率，当然也有的拿酶切的载体做对照，看载体是否酶切完全，以防长出的斑是空载质粒所为。

多谢大家的热情回复，我今天换了感受态和平板，重新再做一次，看看结果！

是不是菌太浓了？OD600多少？用多少毫升菌液？

楼主结果如何？可否解决问题了？