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细胞技术讨论版零解答帖子整理专贴



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                                                                                        引自:PCR技术版---kaige88版主

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1.如何提取叶绿体中内囊体上的黄素蛋白?如何提取叶绿体中内囊体上的黄素蛋白?
2.已经构建好载体,正准备转染,选用的载体是ambion的Psciliner3.1H1-neo, 说明书上说质粒里面带有GFP的干扰序列,需要用带有GFP的质粒共转染来做阳性对照,想请教一下,对于这个带有 GFP的质粒的选择有什么具体要求吗?另外有哪些质粒是专职表达GFP的呢?各位老师谁那是否有相关的质粒没有,是否可以赠送我一些?
    另外还想请教各位一个问题,如果shRNA表达载体里面不带有GFP这样的基因,那么判断它到底有没有转染进入细胞用什么办法 呢?G418筛选好像是进行长期稳定转染用的,但是我用的正常的组织细胞,可能稳转比较困难,那么我在48小时以内如何判断质粒已经转入细胞了呢? 求助有关共转染的问题!!!
3.有没有各种小鼠肝癌细胞株特性比较啊?有没有各种小鼠肝癌细胞株特性比较啊?
4.请教大家谈下在菌种冷冻干燥真空保藏过程中,-78摄氏度预冻一般是三个小时,但是这个时间是怎么来的?预冻时间对于细胞以后复苏有什么样的影响?短了肯定是冻不住,但是长了呢?会产生什么样的影响?菌种保藏中低温预冻对细胞活性的影响
5.想检测胚胎里的某种成分,需要将胚胎彻底裂解,我想采用以下方法:通过液氮将胚胎冷冻,取出后立即放到37度,反复冻融几次,不知道行不行?有做过类似试验的吗?请教 胚胎通过液氮冻融裂解的方法
6.

[ 本帖最后由 binbintt 于 07-11-16 16:07 编辑 ]

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