我只能下载一半,所以,麻烦你是否能把该文献发到我的邮箱,万分感谢!
ygwj5@yahoo.com.cn

有一点需要和大家讨论，该篇文献有许多地方没有解释清楚，如，第一步sitefinding，所加入的sitefinder引物是两个一起加入还是只加一种就可以，还有这对引物是根据什么设计的，可以通用到植物上吗？我做了一次没做出来，不知道什么原因，忘高人指点

我做过一次，也没有成功。sityefinder是只加入一个的，如果第一个你做不出来，可以换第二个试试。我觉得这对引物不是通用的，可能要更具不同植物的序列加以调整 ，好像看过有个限制性酶切分析四个碱基的的分布频率的。你用googlescholar搜索sitefinding，出来的结果中有

12楼应该是没看懂，SITEFINDER只加一个，该配对区4个碱基序列可变，也可加长
植物上国内都有人做了，你可以查一下

学习学习，谢谢！

请问：sitefinder中酶切位点后的是简并引物，最后用四个固定的碱基是为了减少产物的种类，对吗？那么，酶切位点前的序列有什么用？要怎么设计呢？

正准备做,看看

感激难以言表！！！！

做过这个PCR，不过这个也不是绝对能够做出来的，也跟基因序列组成有关，也是有随机性的

谢谢楼主分享啊！