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SDS-PAGE电泳


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1# 大 中 小 发表于 07-11-12 19:28  只看该作者

SDS-PAGE电泳

最近在跑SDS-PAGE电泳时发现---溴酚兰在浓缩胶里不能压缩成一条细线，进入分离胶时还比较宽；还有胶脱色后蛋白条带比原来淡了许多，不知是什么原因
今天刚换了APS和SDS，效果好了一点，但还是很淡

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2# 大 中 小 发表于 07-11-12 19:37  只看该作者
只要带型没有弥散，这个不是问题，你可以更换BUFFER（可能pH变化）试下
带变淡应该和压缩胶没压成线这个没有什么关系，除非有弥散现象

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3# 大 中 小 发表于 07-11-12 20:17  只看该作者
谢谢nano，
明天调一下PH试试，但是带变淡一直没有找到原因，下面是我跑的不同阶段的胶，请nano帮着分析一下
谢谢
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4# 大 中 小 发表于 07-11-12 23:35  只看该作者
不同阶段？那就不是一个样品咯，为什么一定认为样品会一样浓？
MARK也不一样浓，这个好像是你染色的问题

[ 本帖最后由 nano 于 07-11-12 23:39 编辑 ]

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5# 大 中 小 发表于 07-11-13 15:04  只看该作者
进入分离胶带比较宽，你可以在低电压时间稍微延长一些啊。关于条带颜色问题，我也觉得和染色、脱色有关。

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6# 大 中 小 发表于 07-12-2 20:07  只看该作者
武林三国
可能和染色液时间和浓度有关系，换一下染色液，另外把蛋白浓度稍稍加大

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