威望、酷币、资源币获取方法及用途
基因酷保藏中心资源获取规则
保藏中心资源获取流程详细说明
基因酷保藏中心资源进出明细
领取红包获得资源币和威望
各版诚拜版主,每版欲聘5名
生物科研网址导航使用说明
生物科研网络助手使用说明
基因酷资源免费,望您点击广告
来支持基因酷
基因酷大事件回顾
论坛使用说明及酷友指南
基因酷FTP的使用及说明
基因酷个人空间(博客)使用帮助
邀请您参与《生物信息学分析系列图书》编写
祝贺酵母共享平台的建立,征集细胞株共享实验技术支持!
科研文献、资料分享交流倡议
基因酷网络资源调整公告!
情系灾区,奉献爱心
发新话题
打印

求助有关共转染的问题!!!



求助有关共转染的问题!!!

各位老师,
       大家好,
      我在做RNAi方面是新手,现在已经构建好载体,正准备转染,我选用的载体是ambion的Psciliner3.1H1-neo, 说明书上说质粒里面带有GFP的干扰序列,需要用带有GFP的质粒共转染来做阳性对照,我对这方面现在还不太明白,我想请教一下各位老师对于这个带有 GFP的质粒的选择有什么具体要求吗?另外有哪些质粒是专职表达GFP的呢?各位老师谁那是否有相关的质粒没有,是否可以赠送我一些?
    另外还想请教各位一个比较低级的问题,如果我的shRNA表达载体里面不带有GFP这样的基因,那么判断它到底有没有转染进入细胞用什么办法 呢?G418筛选好像是进行长期稳定转染用的,但是我用的正常的组织细胞,可能稳转比较困难,那么我在48小时以内如何判断质粒已经转入细胞了呢?
    本人初接触RNAi,还有好多不太懂的地方,希望各位老师不吝赐教!谢谢!

TOP


没有朋友能帮帮忙吗?

TOP



我也是同样的问题。。。

类似的问题
我们的载体带有目的片断和GFP

TOP


你们带有GFP不是直接就能够看到了吗?

TOP


用染色的方法行么?我们是用染色的方法鉴定阳性对照 的

TOP

发新话题