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培养SP2/0,细胞死亡,培养基中有活动的小点(解决)



培养SP2/0,细胞死亡,培养基中有活动的小点(解决)

我和别人那里要的SP2/0细胞(每回失败,要了3回了,都不好意思了,呵呵),他们使用1640+10%gibcoNCS, 据文献和他们那边的人说DMEM养是没有问题的,可是问题来了。
第一回, 细胞长了5天状态很好,可以说茁长成长,可是出问题了,细胞变的边界不清,变大,培养基出现很多小点,其中很多都可以活动(肯定是生命呀,呵呵,感觉细胞内也很多,特别是破碎的细胞,细胞感觉象是被他们撑破的),细胞慢慢全部裂解了
第二回,来了之后细胞第3天就裂解了,几乎全部破碎
第三回,要了2瓶,一瓶第二天细胞就裂解了,另一瓶第二天传代2瓶,分别拿1640和DMEM培养,细胞生长状态很好很好呀,认为这回终于成功了,并且一周后还用于细胞融合的预试验了呢。可是第11天出问题了,细胞很显然变的没有前些时间透亮了,并且细胞变大了,生长变慢,又出现第一回说的奇怪的无名生物,破裂的细胞里面几乎都是这个无名生物,培养基不变色,这个无名生物可能是寄生性的,生长慢。


别人那里养的SP2/0细胞状态很好,我们实验室的其他人和我使用一样的血清,他们的细胞养的也很好,我在他们的培养瓶中也看见了这种无名生物,可是很少很少,我找了很长时间才看见的! 我推测,这个生物应该是血清里的,而且是寄生性的,他有侵染不完整细胞的能力

细胞照片等两天传上去 嘿嘿!

问题解决,细胞应该是染病毒了,所以裂解了,和培养基内活动的小点没有关系。细胞内那些明显的突起(很像细胞器的),应该是凋亡小体。

[ 本帖最后由 車!! 于 07-11-17 14:42 编辑 ]
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问题解决了

这是我从中科院买的细胞株,他们培养基中也有很多活动的小点点,红色的,我们培养基里面也有,应该是血清里面带的,不影响细胞生长 见黑色圆圈内的红色小点!

[ 本帖最后由 車!! 于 07-11-17 14:41 编辑 ]
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我也遇到了同样的问题啊,那有什么解决的方法?

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他们不影响细胞生长,我没有处理他们.  我直接从中科院买的细胞株,他们里面也有的. 可能就是别人经常说的黑绞虫吧? 不需要特别处理的.
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可是我的细胞老是长不好啊,生物速度超慢。有时本来长是好好的,扩瓶之后,原来反而长得不好,而新瓶的长得不错啊。原来那里越长越好黑色的物质,而且悬浮的细特别多,换液之后,悬浮的细胞又长了,而贴壁的没有增多,不知怎么回事?

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很有可能染支原体了,它的发作也有周期性。你换新瓶子后,可能暂时好一些,但过段时间还是一样(即使换了新瓶子你的细胞肯定长的没有以前迅速)。
建议你: 扔到细胞,把使用过的培养基什么的一并处理掉,其他的器具可多灭菌几次。然后重新复苏细胞。
         如果细胞比较珍贵的话,可以使用泰乐菌素冲击治疗一周,只能是试验一下

[ 本帖最后由 車!! 于 07-11-22 17:34 编辑 ]
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哦,知道了,谢谢你啦!郁闷的是今天刚好用那些细胞融合了:(

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