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用cＤＮＡ为摸板扩出的ＰＣＲ为一大片弥散的片状带


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1# 大 中 小 发表于 07-10-25 12:17  只看该作者

用cＤＮＡ为摸板扩出的ＰＣＲ为一大片弥散的片状带

用cＤＮＡ为摸板扩出的ＰＣＲ为一大片弥散的片状带，请问各位遇到过吗？在另外一个基因上，也用cＤＮＡ扩增的ＰＣＲ产物，刚开始５min还是一条完整的带，但是到１５min后，就在目的片段位置附近变成弥散的片状了，请问各位高手碰到过吗？是怎么解决的啊？

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2# 大 中 小 发表于 07-10-26 10:25  只看该作者
这个不用解决的阿，cDNA跑胶就是一片弥散的，因为它毕竟是单链DNA，一般可以通过cDNA的跑胶来初步判断你的RNA反转录得情况，但是还不能说明就一定有你的目的基因，这个还需要你用你的特异引物进行扩增来加以辅助判断，当然最好加上内参可以直观反映。

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3# 大 中 小 发表于 07-10-26 13:02  只看该作者
可能模板量太低了，我有出现过这种情况，把模板量提高并换引物后就OK了。
不过具体问题具体分析！

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4# 大 中 小 发表于 07-10-26 16:54  只看该作者
我是用cＤＮＡ为摸板做的ＰＣＲ，ＰＣＲ产物为弥散片状，怎么回复人这么少啊，还有高手遇到过吗

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5# 大 中 小 发表于 07-10-26 20:39  只看该作者
cDNA如何得来的？引物照什么设计的？

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6# 大 中 小 发表于 07-10-28 18:51  只看该作者
hehe  
bucuocuo

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7# 大 中 小 发表于 07-10-30 23:13  只看该作者
“刚开始５min还是一条完整的带，但是到１５min后，就在目的片段位置附近变成弥散的片状了，”
时间是指的什么？跑胶的时间吗？

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