:( 本人在夹心ELISA实验中，先用一种单抗包被ELISA板，使用的酶标抗体是biotin标记的另一单抗，但问题是本底高，该如何控制？请教各位。拜托。

1.有很多影响因素，建议你看下我在发的共享帖子
ELISA测定中影响因素
http://www.genecool.com/bbs/thread-7961-1-1.html
2.如果你的抗试剂的浓度过高也会造成本底高的情况，建议你做一个抗试剂的滴度实验！

我也有同样的问题，用的是生物素-亲和素系统，空白对照用的是含1%BSA的PBST，未加任何其他东东，可是本底也很高，达到0.6左右。很急啊，求大伙高人指点。

可能出现的原因有：
1。单抗与后续的生物素标记的抗体发生了非特异性吸附，所以加入HRP标记的链亲和素时，导致OD值相应增加；
2。加入HRP标记的链亲和素的浓度过高，洗涤不彻底；
3。封闭不完全
4。生物素标记的抗体与封闭剂发生非特异性吸附；
。。。
以上是个人看法。仅供参考。