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求助:胶原蛋白多肽的浓缩、纯化
lm18703070
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发表于 07-10-24 17:41
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求助:胶原蛋白多肽的浓缩、纯化
请教各位大虾,我们实验室的条件不好,现在我做了一些蛋白质的酶解液,分子量在1万以下,用什么方法浓缩、纯化好,并且简单易行。我们实验室有冻干机,但是没有超滤,也没有柱层析,:( 谢谢。也是挺急的,并且老师还希望我能做出小肽的氨基酸序列,我不是学生物专业的,对于PCR的技术之类的不懂,不知道有没有其它的方法能够测定??非常感谢。
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shadowfly
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发表于 07-10-24 17:54
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制备和纯化没有柱子怎么行啊。
如果你只是需要很少量用来分析的话,你可以试试制备电泳。
如果有钱而且用的次数不多的话可以直接买预装柱
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lm18703070
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发表于 07-10-25 16:37
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准备买柱子了,谢谢哈。
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nano
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发表于 07-10-26 20:00
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实验室没有纯化设备可以去用HPLC,多肽用普通柱纯化比较困难,而且酶解液含物质种类太多了,最后测序又需要高纯度
另:这个和PCR好像不沾边
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lm18703070
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发表于 07-10-28 17:34
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前面看到过你的很多知识,电泳也是在你的指教下,我的实验做的越来越像那么一回事了,衷心的谢谢你。如果用HPLC该怎么测呢,我最后需要得到的是粉状的产品,现在完全处于混沌状态。
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nano
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发表于 07-10-28 20:32
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如果目的是质谱,那还是用液质联用比较好,从液相上分离出的肽直接进入质谱仪,如果要得到粉状的产品,那好像量很大,液相一般不容易制备这么大的量,需要用半制备型的AKTA比较方便。用普通填料手动纯化纯度很难要求,检测精度也低,测序也就谈不上了。
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lm18703070
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发表于 07-10-31 16:28
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回复 6# 的帖子
OK!!!非常非常的感谢!
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