威望、酷币、资源币获取方法及用途
基因酷保藏中心资源获取规则
保藏中心资源获取流程详细说明
基因酷保藏中心资源进出明细
领取红包获得资源币和威望
各版诚拜版主,每版欲聘5名
生物科研网址导航使用说明
生物科研网络助手使用说明
基因酷资源免费,望您点击广告
来支持基因酷
基因酷大事件回顾
论坛使用说明及酷友指南
基因酷FTP的使用及说明
基因酷个人空间(博客)使用帮助
邀请您参与《生物信息学分析系列图书》编写
祝贺酵母共享平台的建立,征集细胞株共享实验技术支持!
科研文献、资料分享交流倡议
基因酷网络资源调整公告!
情系灾区,奉献爱心
发新话题
打印

去内毒素(转染级)质粒提取



去内毒素(转染级)质粒提取

除了氯化铯和试剂盒,又有了新的选择——精胺法。这个方法是在别的论坛上看到了,当时看到底下的跟帖是褒贬不一,有的说方法好,有的说成本高,还有的说亲自做了根本纯化不到质粒。呵呵,本人苦于实验室超速离心机坏了,试剂盒又太贵,所以买了一点精胺(Sperming-4HCl,Sigma)试了试,最后结论得率还行,纯度够转染,成本并不贵。具体方法是参照一篇文章,贴在附件中。
个人的建议:1.得率不如氯化铯,但不用超速离心,不用EB,不用酚,有4度高速离心机足矣——对实验室条件要求比较低;
            2.成本,Spermine-4HCl,Sigma的是1g 500人民币左右,1g可以配成190mL的10×储存液,500mL的菌液最后只要500uL10×储存液,一次成本1块3多一点,加上其他药品(溶液I II III , LiCl……) 成本肯定不超过2块,比目前大部分的试剂盒便宜的多,至于和氯化铯的成本,不太清楚。
            3.最好还是买Sigma的,前面提到的论坛上,有兄弟说用生工(1g200左右)的根本沉淀不下来,个人没敢去试,如果有兄弟用生工的能做出来,请回帖一下,呵呵,成本会进一步下降。
附件: 您所在的用户组无法下载或查看附件
本帖最近评分记录
  • 纤夫 威望 +2 原创佳作,奖! 07-10-22 12:16

TOP


顶啊,如果早点看到这个文章我就不用买试剂盒了,我买的是invitrogen公司的除内毒素质粒抽提试剂盒,也不用超离,但是有点贵倒是,大概一次需要100元。谢谢楼主

TOP

发新话题