分子诊断技术
[align=center][font=宋体][size=11pt][b]分子诊断技术[/b][/size][/font]q$v5ZA7wG[/align][font=宋体][size=11pt]主要内容:[size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]1[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31765][color=blue]分子诊断原理[/color][/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]2[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31766][color=blue]分子诊断实验方法[/color][/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]3[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31767]分子诊断技术前景及应用[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]4[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31768]肿瘤标志物检测原理[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]5[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31769]几种重要肿瘤标志物及其应用[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]J%h.rv.o e:J#VD
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]6[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31770]基因诊断原理[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]7[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31771]基因诊断技术方法分类[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]\&T*T*r:eV
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]8[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31772]基因诊断技术的选择[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]u6R)pL)|2K
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]9[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31773]基因诊断技术的质控指标[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size] gmy)Y_v*F
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]10[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31774]基因诊断技术应用[/url][/font][/size][/color][size=11pt][/size]#@H0Q_-FoU_
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]11[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31777]分子诊断之[/url][/font][/size][/color][url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31777][color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]PCR[/size][/font][size=11pt][font=宋体]技术[/font][/size][/color][/url][size=11pt][/size]],\JK#O
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]12[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[/font][/size][/color][url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31778][color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]PCR[/size][/font][size=11pt][font=宋体]技术在病毒学中的应用[/font][/size][/color][/url][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]13[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[/font][/size][/color][url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31779][color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]PCR[/size][/font][size=11pt][font=宋体]技术诊断[/font][/size][/color][color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]HIV[/size][/font][size=11pt][font=宋体]感染[/font][/size][/color][/url][size=11pt][/size]*?6Xn7w/_QWgi
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]14[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[/font][/size][/color][url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=1#pid31780][color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]PCR[/size][/font][size=11pt][font=宋体]技术诊断骨肿瘤[/font][/size][/color][/url][size=11pt][/size]
[color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]15[/size][/font][size=11pt][font=宋体].[/font][/size][/color][url=http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8208&page=2#pid31781][color=blue][font=Times New Roman][size=11pt]PCR[/size][/font][size=11pt][font=宋体]技术诊断结核杆菌[/font][/size][/color][/url][/size][/font]d\ e!sl2R
[font=宋体][size=11pt][/size][/font]
[font=宋体][size=11pt][b]声明[/b]:[/size][/font][size=11pt]
[font=Times New Roman]1[/font][/size][font=宋体][size=11pt]、本篇涉及的资源主要源于网络及相关书籍,由酷友搜集、分析、整理、审改,供大家学习参考用,如有转载、传播请注明源于基因酷及本篇的工作人员;若本篇侵犯了您的版权或有任何不妥,请[/size][/font][size=11pt][font=Times New Roman]Email [/font][email=genecool@126.com][font=Times New Roman][color=#000000]genecool@126.com[/color][/font][/email][/size][font=宋体][size=11pt]告知。[/size][/font][size=11pt] G L0i,d2^/Ec{q
[font=Times New Roman]2[/font][/size][font=宋体][size=11pt]、由于我们的学识、经验有限,本篇难免会存在一些错误及缺陷,敬请不吝赐教:请到基因酷论坛([/size][/font][size=11pt][url=http://www.genecool.com/bbs][font=Times New Roman][color=#000000]www.genecool.com/bbs[/color][/font][/url][/size][font=宋体][size=11pt])本篇对应的专题跟贴指出或[/size][/font][size=11pt][font=Times New Roman]Email [/font][email=genecool@126.com][font=Times New Roman][color=#000000]genecool@126.com[/color][/font][/email][/size][font=宋体][size=11pt]。[/size][/font])XN;?Bpor^
[font=宋体][size=11pt][b]致谢[/b]:[/size][/font]
[font=宋体][size=11pt]整理者:[/size][/font][size=11pt][font=Times New Roman]microfox [/font][/size][font=宋体][size=11pt]审改者:[/size][/font][size=11pt][font=Times New Roman]wny[/font][/size]
[font=Times New Roman][/font]~%dB/G:P7pM!v
[font=Times New Roman]主要参考资料: h{'@*z/K n4B
[font=宋体][size=11pt]《肿瘤的分子诊断与预测》[/size][/font][size=11pt][size=11pt][url=http://www.zker.cn/Book/BookSearch.aspx?index=2&Q=%c7%d5%c2%d7%d0%e3][font=宋体][color=#000000]钦伦秀[/color][/font][/url][/size]
[font=宋体][size=11pt]《分子诊断学》[/size][/font][size=11pt] [url=http://www.china-pub.com/search/power_search/power_search.asp?key1=%C5%C1%CC%D8%C0%EF%C5%B5%CB%B9%28George+Patrinos%29][font=宋体][color=#000000]帕特里诺斯[/color][/font][/url][/size]
[font=宋体][size=11pt]《分子诊断学》吕建新[/size][/font][size=11pt][/size][/size]
[/font][font=Times New Roman][/font]d/yhx/l&L2z
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[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-14 09:06 编辑 [/i]]
分子诊断技术原理
[align=center][b]分子诊断技术原理[/b]2^ip%i){(K$^ zt&k|**** Hidden Message *****
"Y"an2s#f+B_R
[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:21 编辑 [/i]]
分子诊断实验方法
[align=center][b]分子诊断实验方法[/b][/align]**** Hidden Message *****
分子诊断技术前景及应用
[align=center][b]分子诊断技术前景及应用[/b][/align]9Hc\I!D,HBHRn\n
分子诊断技术在检验医学的基础和临床研究中显示出强大的优势,例如,在乙型肝炎的诊断和治疗中,应用DNA定量技术为乙型肝炎的治疗和预后监测提供了重要依据,但近近不无症状乙型肝炎表面抗原携带者及乙型肝炎表面抗阴性者的人群中检出了前C终止密码子变异(G1896A)。研究表明,突变将导致乙型肝炎病毒继续复制,因此这一信息对于临床诊疗十分重要。又如庆大霉素等氨基糖苷类抗生素的毒副作用之一是诱发耳聋,且已证明线粒体DNA中12S rRNA基因A1555G突变和C1494T突变是氨基糖苷灶抗生素诱发非综合征耳聋的分子基础,即只有带有突变的个体在使用氨基糖抗生素后才发生耳聋,因此,检测12S rRNA基因突变对于指导临床用药具有重要意义。再如,最近我国研制的一种传染性非典型肺炎又称严重急性呼吸综合征(SARS)病毒全基因组芯片,覆盖了SARS病毒基因组的全部序列,旨在检测SARS病毒的同时全面监测该病毒全基因组变化,这种病毒全基因组时代。蛋白芯片,特别是免疫芯片(immunochip)等分子诊断学新技术的快速发展,又为肿瘤学(检测多种肿瘤标志物)、内分泌学(检测数种不同激素)、自身免疫诊断(检测各种过敏原)、血液学(输血筛选)及环境微生物监测等提供了新方法和新思路。2000年,Joos等应用免疫微数组实现了18种自身抗原的诊断;2001年,Huang等实现了基于抗体微数组的24种细胞因子的检测,这些新方法和新技术的广泛应用,不仅为临床医学提供更丰富、更有效的数据和信息、而且有利于临床医生对疾病进行全面分析,为实现“疾病以治疗为主转向以预防为产”奠定了基础。
分子诊断技术虽然具有特异性好、灵敏度高、针对性强、诊断快速等优点,但其存在操作复杂和难经进行临床检验诊断,需要解决的关键是方法的标准化。《The Journal of Molecular Diagnostics》杂志曾在2001年基因技术用于疾病的诊断。FDA将着重检查评估家系遗传分子诊断的方法和实验室资历质等;实验方法的原理、步骤、应用范围报告方式,以及与临床诊断一致性等因素进行证,并在全美建立一个完善的遗传学检验的质量控制体系,规定报告模式和回馈给被检者的信息范围。专家认为,实施这一计划的目的即为了安全、有效、合法地进行分子诊断。我国各实验室建立了很多的分子诊断方法;有的已应用于临床,但往往存在方法不够成熟和稳定性的问题,也缺乏方法学的比较研究,导致检验结果难以为临床提供确切的信息,近年来有关部门已开始对感染疾病的病原微生物核酸的检测进行了管理,但尚未涉及致病基因检测领域,因此,建立分子诊断方法的金标准和标准操作等程序(standard operation procedure,SOP),并尽早制定出一个符合中国国情分子诊断监管体系已迫在眉睫。
总之,分子诊断学将成为21世纪检验医学的主题。分子诊断技术将朝着高效、准确、灵敏和无创伤性的方向发展;21世纪是以生物技术为突出代表的生命科学和世纪,分子诊断的技术优势和巨大潜力,尤其是生物芯片的发展,将成为最有希望为改善世界各国,特别是广大发展中国家人们的健康状况做出贡献的生物技术之一。随着人类基因组计划的完成和蛋白质组计划的启动,分子诊断方法将极大的推动现代检验医学的发展,并在更深层次揭示疾病的本质,指导临床诊断和治疗。
[b]存在问题[/b]#ug |tbA
在分子诊断领域领域,真正应用临床使患者受益,开展的还比较局限,最大的问题是假阳性和假阴性,因此建立费用低廉、结果可靠的、操作方便的分子诊断技术是迫切需要解决的问题,建立标准化的实验操作程序和标准化的分子诊断实验室,实现分子诊断标准化;除了要在诊断技术方面逐步实行标准化外,对肿瘤诊断指标也要进行标准化。随着人类基因组计划和后基因组计划的实施,分子诊断技术也将得到进一步的成熟和完善. 材料学、方法学、传感器和装置成为制约因素
分子诊断之肿瘤标志物检测原理
[align=center][b]肿瘤标志物检测原理[/b]#h$`et1~b6C's**** Hidden Message *****
几种重要肿瘤标志物及其应用
[align=center][b]几种重要肿瘤标志物及其应用[/b]**** Hidden Message *****&o$@ bz6@l
[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:24 编辑 [/i]]
分子诊断之基因诊断原理
[align=center][b]基因诊断原理[/b][/align]XH(E%\$xtC+oi;J!R;vU/M:e's J O
基因诊断(gene diagnosis)又称DNA诊断,是利用DNA重组技术,直接从DNA水平来检测人类疾病的新的诊断手段,是以探测基因的存在,分析基因的类型和缺陷及其表达功能是否正常,从而达到诊断疾病的一种方法。是继形态学、生物化学和免疫这诊断之后的第四代诊断技术,它的诞生和发展得益于分子生物学理论和技术的迅速发展。基因是遗传的物质基础,它决定了病原体的生物学特性。除个别病毒外,现知的所有微生物均是以核酸为遗传物质。病原体的基因既可以是脱氧核糖核酸(DNA),也可以是核糖核酸(RNA)。基因是决定遗传性状的最基本的功能单位,生物体的完整结构(细胞器、膜结构等)的保证及各种功能的发挥有赖于多种基因的正常表达及相互调节,这些基因构成了一个生物体的完整的基因组。简单病原体的基因组,如某些病毒仅由一至数个基因组成,细菌的基因组则含有数千种基因。但是任何一种病原体均有其独一无二的基因组成和结构,尤其是基因的一级结构,这就为病原体的基因诊断奠定了物质基础。基因诊断的目的就是要通过各种手段,如杂交、扩增等,去寻找和发现这些独特基因组、基因或基因片段的存在,从而证实某种病原体的存在。
1.传统诊断方法的缺陷 ZpS f/f!LA K
传统的疾病诊断方法大多为“表型诊断”,以疾病或病原体的表型为依据。而表型的改变在多数情况下是非特异的,出现的时间也较晚,易错过治疗的最佳时期。某些疾病本身不呈现显著的表型改变,用传统的检测方法易出现“假阴性”。另外,传统诊断方法费时,精确度低。
2.基因诊断的优点 +E6s[%k$G5W
基因诊断以基因作为检测对象,因而具有以下优点:dx'lkZj
(1)针对性强,特异性高。
(2)标本用量少,来源广,灵敏度高。病人的血液、尿液和羊水脱落细胞以及头发等均可用以检测,由于基因体外扩增技术的发展,待分析的标本只需微量,目的基因只需pg水平。y U/T%p~Z6sE
(3)适应性强,检测范围广。
由于基因探针的来源种类较广,其探针序列可为已知亦可为一类特定的基因组,可为内源性基因亦可为外源性基因,在感染性疾病的基因诊断中,不仅可检出正在生长的病原体,也能检出潜伏的病原体,能确定以往感染,也能确定现行感染。对那些不容易体外培养和不能在实验室安全培养的病原体,也可用基因诊断检测,辅以DNA片段长度多态性分析,还可以对病原体进行基因分型。另外,基因诊断可用于研究基因差异表达,对有组织和分化阶段特异性表达的基因进行检测;还能对疾病的易感性、发病类型和阶段以及疾病的抗药性作出判断-bD PD r%J
&o)c S!so/C s,Q'C
[[i] 本帖最后由 microfox 于 07-8-15 11:11 编辑 [/i]]
分子诊断之基因诊断技术方法分类
[align=center][b]基因诊断技术方法分类[/b] [/align]Y"Ks-lKH?**** Hidden Message *****
分子诊断之基因诊断技术的选择
[align=center][b]基因诊断技术的选择[/b] [/align].e+Y$S[5\NZKH+_**** Hidden Message *****
[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:25 编辑 [/i]]
分子诊断之基因诊断技术的质控指标
[align=center][b]基因诊断技术的质控指标[/b] c;UeP-F7a**** Hidden Message *****j x9FlDt[W;|
[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:26 编辑 [/i]]
分子诊断之基因诊断技术应用
[align=center][b]基因诊断技术应用[/b]5l] Q n;KGwz[/align]
人类疾病都直接或间接地与基因有关。也就是说,基因变化是大多数疾病的主要病因。根据这一概念,人类疾病可大致分为3类:经典的单基因病(由一个基因位点上突变引起)、多基因病(如高血压、糖尿病和肿瘤等)和获得性基因病(即由病原微生物感染引起的感染性疾病)。因此,人们可以在基因水平上对大多数疾病作出诊断。利用基因诊断技术,不仅可以在DNA水平上检测与疾病相关的内源基因和外源基因的存在、结构变异及基因多态性,而且可以在RNA水平上检测致病基因的表达异常。
1.遗传性疾病的诊断 0K)L+{bTQ
1976年美国加州大学旧金山分校的华裔科学家简悦威(Y W Kan)采用液相DNA分子杂交技术诊断α-地中海贫血,从而揭开了分子生物学技术用于临床诊断的序幕。此后,基因诊断被广泛应用于包括地中海贫血在内的许多遗传病。3_W#l#R|}4s ?
黎青等用裂口PCR(gap PCR)对227例经血红蛋白电泳、红细胞脆性等筛查后疑为α-地中海贫血患者进行检测,结果发现东南亚双缺失型突变杂合子106例,纯合子(Bart’s)12例,CS和血红蛋白H病分别1例和2例;同时又用反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)在129例疑为β-地中海贫血患者中检出了β-地中海贫血的16种突变的12种。刘敬忠等用长距离PCR(LD PCR)结合基因多态性分析诊断了血友病A中高度异质性的Ⅷ因子(FVⅢ)基因突变。苯丙酮尿症(PKU)是一种常染色体隐性遗传病,国内目前还不能普遍实行PKU的早期诊断和治疗。王修海等利用聚合酶链反应-短串联重复序列(PCR-STR)和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对5个PKU家系进行了产前和症状前的基因诊断,其中4个家系得到明确诊断,诊断率达80%。
2.感染性疾病的诊断 我国是病毒性肝炎的高流行区。自1965年Blumberg在澳大利亚土著人血清中发现与乙型肝炎病毒(HBV)相关的抗原(澳大利亚抗原)以来,实验室检查,特别是基因诊断为肝炎患者或病毒携带者的检出作出了巨大贡献。Choo采用分子生物学方法获得了至今尚未培养成功的丙型肝炎病毒全基因序列,据此研制了检测试剂盒,并成功应用于临床,近年又提出亚型分析并用于指导治疗和流行病调查。在人类免疫缺陷病毒的研究以及传染性非典型肺炎(SARS)研究中,基因诊断技术又及时提供了大量重要信息,基因诊断技术对人类防治病毒性疾病提供了有力的武器。细菌和真菌的感染在临床上最棘手的问题是耐药,从分子水平上阐明耐药发生的原因,病原微生物在抗菌药物诱导下,如何通过基因突变而出现耐药表型是耐药研究的深层次问题,基因突变与其他耐药机理(如靶位、蛋白修饰、质粒传递、泵机制等)如何相互作用,这些方面的研究正方兴未艾。
3.肿瘤的诊断 人体由于各种内在因素或外在因素启动了某些癌基因或使抑癌基因发生抑制,打破了正常的免疫监视和免疫识别,使某些细胞获得恶性增长能力,导致人体某些组织或器官出现肿瘤。目前对人体发生的肿瘤几乎全部进行过分子水平的研究,其中对血液系统和实体瘤的研究最为突出。有学者认为,血液病特别是白血病的分型,必须依赖分子生物学技术,已成为常规诊疗手段。
癌基因、抑癌基因及其产物(ras家族、C-myc、C-erbB2、 EGF、TGF-α、P53、MTS1等)作为肿瘤标志物在肿瘤诊断,检测肿瘤复发与转移,判断疗效和预后以及人群普查等方面都有较大的实用价值,而且在肿瘤发生和发展机理研究中也具有重要作用。同时也为临床肿瘤治疗提供依据及以其为靶,进行肿瘤的靶向治疗及免疫治疗。c"uQLr
4.临床药学的应用 随着人类基因组计划(HGP)的完成,药物基因组学(pharmacogenomics)作为新兴学科在临床药学实践中发挥着越来越重要的作用。目前,利用基因诊断技术便可以分析出某一药物主要代谢酶的基因是否异常,从而客观、准确地了解这一个体在药物反应方面的特异性。日本学者给263例患者服用同一剂量的去甲替林,结果发现血浆中该药浓度的个体差异可高达100倍以上。药效的个体差异来源于遗传类型的不同。基因诊断在药物基因组学中的应用使得包括药物浓度监测(TDM)、用药指导(包括个体医疗)以及新药3期临床的管理等工作发生巨大变化,日本学者对此进行了大胆尝试 。随着基因诊断技术(特别是基因芯片)准确性的提高、成本的降低、结果判定的加速,相信在不远的将来会用于日常药物治疗中。
5.其他应用 人体的多样性和个性取决于基因组DNA核苷酸序列的差异,即DNA的多态性。运用基因诊断技术可以搜录和分析DNA多态性,极大地推动法医生物学的发展。特别是第三代遗传标记———单核苷酸多态性的发现,使得人类的遗传变异研究更加精细。人的体型、长相约与500多个基因相关,应用基因诊断技术理论上可以揭示人的外貌特征、脸型、长相等。:v ~(NJMd
利用基因诊断技术还可以对胎儿进行遗传病相关基因的监测及产前诊断,为优生优育提供有力保证;而且可以全面监测200多个与环境影响相关的基因,这对生态、环境控制及人口健康有着重要意义。&}J6a@9?gUnwCH
[[i] 本帖最后由 microfox 于 07-8-15 11:12 编辑 [/i]]
分子诊断之PCR技术
[align=center][b]分子诊断之PCR技术[/b][/align] I GgO?[;p3mxu0T?+p+c p"K
**** Hidden Message *****
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[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:29 编辑 [/i]]
分子诊断之PCR技术在病毒学中的应用
[align=center][b]PCR技术在病毒学中的应用[/b]**** Hidden Message *****Z I"b5Z#i
[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:29 编辑 [/i]]
分子诊断之PCR技术诊断HIV感染
[align=center][b]PCR技术诊断HIV感染[/b]**** Hidden Message *****#o'G-V1Z2gy [3C
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[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:30 编辑 [/i]]
分子诊断之PCR技术诊断骨肿瘤
[align=center][b]PCR技术诊断骨肿瘤[/b]&gB-c{s&d**** Hidden Message *****(i9M L]jF P
S2}vO'Pn#k3Dh!n
[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:30 编辑 [/i]]
分子诊断之PCR技术诊断结核杆菌
[align=center][b]PCR技术诊断结核杆菌[/b]**** Hidden Message *****
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[[i] 本帖最后由 nano 于 08-9-13 07:31 编辑 [/i]] hao 东西啊,谢谢了 不错啊,LZ辛苦了 谢谢分享经验:excellent: 非常感谢无私奉献!
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