有没有用纤维素膜结合抗原来纯化抗体的
请教各位大虾米，你们有没有做过用抗原来纯化抗体的实验，而不是什么盐析啊酒精沉淀啊之类的。9ZS8e9@;E6W H?我的大概实验步骤是首先将一小条PVDF用甲醇浸透后泡在1mg/ml的抗原里5min，然后5%BSA（里面有NP-40）洗去多余抗原30min,|4} S?4P:_
然后将膜放入1ml相应抗血清里结合2h左右（冰上摇晃），最后用pH2.5的甘氨酸洗脱，完了还要加一定的Tris中和酸性。L'u9}7Z a v a1Gj2q
第一次用该方法纯化时，的确纯化下了抗体，最后做western也验证了，但以后再做就再没纯化下抗体，用的是原来的试剂没变，不知道错在哪里，看protocl上要求用新鲜配的甘氨酸，不新鲜的就一点都不行吗，因为pH难调只配了一次一大堆，不知道问题是不是出在这里，另外第一次纯化完的抗体做WESTERN时抗原的量很大，所以不知道是这个方法本来就纯化效率不好呢，还是我后来的操作有问题，请各位大虾指教。
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