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shuanhu2007 发表于 08-9-22 14:59

细菌得计数问题

你们好
        微生物方面的菜鸟问题，10的8次方CFU/50ul菌液浓度，这个浓度怎么来确定。希望各位给出比较具体的做法。

吹不起的清风 发表于 08-9-22 16:07

CFU是菌落形成单位，也就是活菌数，应该要涂板计数了。
但是当你涂板长出菌落来后，原管的CFU应该又变了，所以个人觉得先用紫外分光光度计测得菌浓度，再算出该浓度下得CFU，这样以后就不用涂平板了！

xiaofeixia 发表于 08-9-22 23:43

怎么折算呢？

shuanhu2007 发表于 08-9-23 08:53

想问问一楼，用721分光光度计能测吗？OD值多少才可以。。。谢谢

安琪儿 发表于 08-9-23 16:20

1．标准曲线制作

（1）编号  取无菌试管7支，分别用记号笔将试管编号为1、2、3、4、5、6、7。

（2）调整菌液浓度  用血细胞计数板计数培养24小时的酿酒酵母菌悬液，并用无菌生理盐水分别稀释调整为每毫升1×106、2×106、4×106、6×106、8×106、10×106、12×106含菌数的细胞悬液。再分别装入已编好号的1至7号无菌试管中。

（3）测OD值  将1至7号不同浓度的菌悬液摇均匀后于560nm波长、1cm比色皿中测定OD值。比色测定时，用无菌生理盐水作空白对照，每管菌悬液在测定OD值时均必须先摇匀后再倒入比色皿中测定

（4）以光密度(OD)值为纵坐标，以每毫升细胞数为横坐标，绘制标准曲线。

2．样品测定

将待测样品用无菌生理盐水适当稀释，摇均匀后，用560nm波长、lcm比色皿测定光密度。测定时用无菌生理盐水作空白对照。

各种操作条件必须与制作标准曲线时的相同，否则，测得值所换算的含菌数就不准确。

3．根据所测得的光密度值，从标准曲线查得每毫升的含菌数。

每毫升样品原液菌数=从标准曲线查得每毫升的菌数×稀释倍数

polly110是这样做的，摇菌8-12h，然后对菌液十倍稀释进行平板计数法，得出每毫升的含菌量，再对菌液进行稀释，得到你所要求的10的8次方CFU/50ul的悬液。

lanmayifly 发表于 08-11-30 20:47

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还是版主厉害呀:excellent:

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